Insatech logo

Endotoksiner er biologiske kontaminanter, der stammer fra den ydre cellemembran i gram-negative bakterier. Selvom endotoksiner ikke i sig selv er levende organismer, er de en del af bakteriecellen og kan udgøre en alvorlig risiko, når de frigøres og kommer i kontakt med kroppen.

Endotoksiner forekommer naturligt i blandt andet fødevarer og vand og forekommer hyppigt i råmaterialer og produkter. De må ikke forveksles med bakterierne selv.
Endotoksiner er cellekomponenter, som kan blive skadelige, når de frigøres fra bakteriecellen.

I pharmaceutisk produktion, life science og produktion af medicinsk udstyr, er bakteriel endotoksintestning derfor en vigtig del af kvalitetskontrollen. Testningen anvendes til at identificere og kontrollere endotoksiner i produkter, materialer og processer, hvor patientsikkerhed og regulatoriske krav er afgørende.

Denne artikel dykker ned i hvorfor du skal test og hvordan du kan gøre det, samt introducerer dig for den nyere teknologi (microfluidisk), der kan forenkle arbejdsgangen omkring bakteriel endotoksintestning.

Hvorfor tester man for endotoksiner?

Endotoksiner kan udgøre en alvorlig sundhedsrisiko, hvis de trænger direkte ind i blodbanen eller spinalvæsken og dermed omgår kroppens normale forsvar.

Endotoksiner fungerer som pyrogener, det vil sige stoffer, der kan fremkalde feberreaktioner. Ved introduktion i blodbanen eller spinalvæsken kan de i alvorlige tilfælde medføre blodtryksfald, organsvigt, septisk shock eller dødsfald.

En særlig udfordring er, at endotoksiner kan forblive til stede, selv efter at bakterier er fjernet eller elimineret. Sanitering eller fjernelse af levende bakterier fjerner derfor ikke nødvendigvis den toksiske risiko, hvilket er en af årsagerne til, at endotoksintestning er afgørende i medicinske og pharmaceutiske applikationer.

Endotoksintestning er blandt andet relevant ved:

  • Produktion og sammensætning af lægemidler

  • Cleaning validation, herunder sanitering af udstyr og beholdere

  • Fremstilling af buffere

  • Rekonstituering af lægemidler

På grund af endotoksiners udbredelse og resistens over for standardiserende sanitetringsmetoder er grundig test afgørende for at sikre patientsikkerhed i medisinske og pharmaceutiske applikationer.

Er endotoksintestning obligatorisk?

Regulatoriske myndigheder som FDA, EMA og øvrige sundhedsmyndigheder kræver endotoksintestning for at sikre, at produkter overholder gældende sikkerhedskrav og ikke forårsager pyrogene reaktioner.

Endotoksintestning er obligatorisk for flere typer producenter og produkter, blandt andet:

Pharmaceutiske producenter af parenterale lægemidler, herunder:

  • Intravenøse (IV) produkter

  • Intramuskulære (IM) produkter

  • Intratekale (IT) produkter

Producenter af medicinsk udstyr

  • Det gælder særligt produkter med kontakt til blodbanen.

Producenter inden for veterinærindustri og dyresundhed

  • Det gælder produkter med blodkontakt.

De specifikke testkrav afhænger af produkttype, anvendelsesområde og gældende regulatorisk jurisdiktion.

Sievers Eclipse Pipetting

Hvad er bakteriel endotoksintestning (BET)?

Bakteriel endotoksintestning, ofte forkortet BET, er en testprocedure, der anvendes til at detektere og kvantificere bakterielle endotoksiner.

BET anvendes især i regulerede miljøer, hvor produkter, råmaterialer eller produktionsudstyr kan komme i kontakt med blodbanen, sterile produkter eller kritiske produktionsprocesser. Formålet er at sikre, at endotoksinniveauet ligger inden for accepterede grænser, så produktet ikke udgør en risiko for patienten eller brugeren.

Hvad er en LAL-test?

Bakteriel endotoksintestning udføres traditionelt ved anvendelse af LAL, som står for Limulus Amebocyte Lysate. LAL udvindes fra blodet fra hesteskokrabber og har i mange år dannet grundlag for en pålidelig metode til endotoksindetektion.

LAL-testen har været FDA-godkendt som et in vitro-alternativ til pyrogentest i kaniner. Ved anvendelse af lysat fra hesteskokrabber kan bakterielle endotoksiner detekteres gennem reaktioner, der blandt andet viser sig som geldannelse, turbiditet eller farveændring.

Resultaterne vurderes op mod standardkurver, afhængigt af hvilken testmetode der anvendes.

Hestskokrabbe Veolia (1)

Hvordan tester man for endotoksiner? 

Bakteriel Endotoksin Testning (BET) udføres primært ved anvendelse af LAL (Limulus Amebocyte Lysate), som udvindes fra blodet fra hesteskokrabber. Denne banebrydende opdagelse fra 1950’erne blev standardiseret i 1960’erne og dannede grundlaget for en pålidelig metode til endotoksin detektion. 

I dag anvendes der især tre almindelige metoder til bakteriel endotoksintestning. Valget af metode afhænger blandt andet af produktegenskaber, sensitivitet, analysetype og regulatoriske krav.

De tre primære metoder til bakteriel endotoksintestning

Hvordan vælger man testmetode?

I praksis vil valg af metode ofte afhænge af, hvilken type produkt eller prøve der skal testes, hvilke grænseværdier der gælder, og hvordan metoden skal dokumenteres i forhold til gældende krav.

For regulerede virksomheder er det derfor vigtigt, at endotoksintestning udføres efter standardiserede og validerede procedurer, så resultaterne er pålidelige, reproducerbare og dokumenterbare.

Pipettering Af Sievers Eclipse Fra Veolia

Mikrofluidisk teknologi til endotoksintestning

Ud over de traditionelle testmetoder anvendes der i dag også nyere teknologier, som kan forenkle arbejdsgangen omkring bakteriel endotoksintestning.

Mikrofluidisk teknologi er en metode til håndtering og analyse af meget små væskemængder. I forbindelse med BET kan mikrofluidik bruges til at styre og blande prøver og reagenser i små kanaler, så dele af analyseopsætningen automatiseres uden behov for avanceret robotteknologi.

For laboratorier kan det være relevant, når manuel pipettering, operatørvariation, dokumentation og reproducerbare arbejdsgange er vigtige parametre i den daglige kvalitetskontrol.

Hos Insatech arbejder vi med løsningen Sievers Eclipse fra Veolia til endotoksintestning, hvor mikrofluidisk teknologi anvendes til at forenkle og automatisere BET-workflowet i regulerede QC-laboratorier.

Kort opsummering

Endotoksiner er cellekomponenter fra gram-negative bakterier, som kan udgøre en alvorlig risiko, hvis de forekommer i produkter eller materialer, der kommer i direkte kontakt med blodbanen.

Bakteriel endotoksintestning (BET) anvendes til at detektere og kontrollere endotoksiner i pharmaceutisk produktion, medicinsk udstyr, råmaterialer, buffere, rengøringsvalidering og pharmaceutiske vandsystemer.

Den traditionelle LAL-test er fortsat en central metode til endotoksindetektion, og de tre primære testmetoder er Gel-Clot, Kinetic Chromogenic Assay og Kinetic Turbidimetric Assay.

Vores løsning til endotoksintestding baserer sig på Microfluidisk teknologi.

Vil du vide mere om endotoksintestning?

Hos Insatech rådgiver vi om løsninger til endotoksintestning i regulerede miljøer, hvor dokumentation, compliance og driftssikre arbejdsgange er afgørende.

Insatech Medarbejdere Website JEME
Jesper Meier

Key Account Manager - TOC & Endotoxin


Tlf: +45 2761 4537

Email: Jesper.Meier@insatech.com

Skriv til Jesper

Insatech Medarbejdere Website SON Red
KONTAKT VORES EKSPERT

Sarah Omø Nielsen

Product Manager - TOC & Endotoxin


Tlf: +45 2761 4517

Email: Sarah.Nielsen@insatech.com

Skriv til Sarah

FAQ om endotoksintestning

Tilbage til toppen

Search